Nytt legemiddel-screening metoden produserer lenge søkt forbindelser anti-HIV legemiddelkandidater som virker på målet neppe endring


Forskere ved Scripps Research Institute har brukt en kraftig ny metode for screening for å finne kjemiske forbindelser som hemmer aktiviteten til human immunsviktvirus (HIV), virus som forårsaker AIDS. I motsetning til de eksisterende anti-HIV-legemidler, forbindelsene binder seg til et protein som kalles "nucelocapsid", noe som er lite sannsynlig å mutere til medikamentresistente former.

"Mesteparten av forbindelser nucleocapsid hemming som har blitt identifisert til nå er svært giftig, men vår metode for screening hemmere som er mindre giftige og derfor mer egnet til å føre til nyttige stoffer identifisert," sa Scripps Research Associate Professor Bruce Torbett . Torbett er senior forfatter av den nye rapporten, som vises i print 14 juni 2012 av Journal of Medicinal Chemistry.

Nukleokapsid protein av HIV binder seg til den virale genomet til å pakke og beskytte den, og spiller en nøkkelrolle i monteringen av nye kopier av virus, så vel som i revers transkripsjon av det virale genomet inn i DNA. Det har lenge vært et mål for HIV narkotika utviklere fordi det griper viral genom med proteinstrukturer - kjent som sink knokene - som ikke kan endre mye uten å miste sin funksjonalitet. Og derfor er tenkt å ha litt plass til å mutere til resistente former, i kontrast med andre HIV-proteiner.



Toksisitet Screening Out

Men til tross for nesten to tiår med forskning, er det fortsatt ingen FDA-godkjente legemidler som er rettet mot protein nucleocapsid av HIV og dens strukturer av sink knokene. En grunn er at det finnes lignende anlegg i mange cellulære proteiner sunne; således forbindelser som er rettet mot dem har en tendens til å ha uønskede bivirkninger. "Når forskere målrettet nukleokapsidet sink knokene i det siste, de vanligvis endte opp med å produsere giftighet," sa Torbett.

For å øke sjansene for å finne trygge forbindelser, Torbett og hans kolleger - postdoktor Sebastian Breuer, førsteforfatter av studien, og Max Chang og Jinyun Yuan, også postdoktor forskere - begynte med Maybridge HitFinder Collection, et bibliotek 14 400 kjemiske forbindelser som allerede er utelukket fra mange giftige molekyler vidt. The Scripps Research Molecular Screening senter opprettholder den mest moderne utstyr for robot søknad raskt kjemiske analyser for disse bibliotekene. Med hjelp av eksperter screening Scripps Research Professor Hugh Rosen, resirkulering senter Staff forsker Steven Brown, og Forskningsassistent Jacqueline Lohse, Breuer brukt en spesiell kombinasjon av screening tester for biblioteket å raskt fokusere på Maybridge forbindelser nucleocapsid hemmende effektiv og trygt.

Den første screening test anvendes en teknikk kjent som fluorescens-polarisasjon for å måle evnen til hver enkelt forbindelse i biblioteket for å flytte binding av det virale genomet til nukleokapsid protein. (Studien fokusert på type HIV-1, som representerer de aller fleste av HIV-infeksjoner utenfor Vest-Afrika.) Den andre testen, med differensiell skanning fluorimetri, ble påført på 101 medlemmer som har passert den første testen; har identifisert de som utfører forskyvningen ved å binde seg sterkt til nukleokapsid protein i stedet for det virale genomet.

Etter å eliminere kandidater svakere og mer giftig med ytterligere tester, Breuer, Torbett, og deres kolleger konkluderte med 10 forbindelser. Detaljerte analyser av disse ga to som var kraftig nok til å hemme viral smittsomhet i cellekulturtester, uten å være altfor giftig.

"Vi gikk veldig raskt å få et begrep om å ha disse to hemmere med demonstrert anti-HIV aktivitet i celler," sa Torbett.

På jakt etter den "sweet spot"

Med hans Scripps Research kolleger MG Finns og Valery Fokin, Torbett nå planer om å evaluere forbindelser som er nært knyttet til de to hemmere for å se om forskerne kan finne som er enda mer sikker og effektiv. Torbett og kolleger også har tenkt å bruke den samme metoden for kombinasjon av screening store biblioteker for å identifisere forbindelser helt nye forbindelser nucleocapsid hemming.

For å få en bedre forståelse av hvordan disse hemmere, er Torbett samarbeider også med Scripps Research strukturelle biologer, inkludert David Stout og Arthur Olson, og virolog John Elder å utføre studier av røntgenkrystallografi av hemmere i kombinasjon med nucleocapsid protein HIV.

"Det overordnede målet er å finne en" sweet spot "på nucleocapsid protein som kan være målrettet effektivt av et lite molekyl narkotika uten å forårsake toksisitet," sa Torbett.

0

Kommentarer - 0

Ingen kommentarer

Legg en kommentar

smile smile smile smile smile smile smile smile
smile smile smile smile smile smile smile smile
smile smile smile smile smile smile smile smile
smile smile smile smile
Tegn igjen: 3000
captcha